凱氏定氮法(半微量)測定胰激肽原酶的氮含量
1 前言
滴眼液中氮含量約為0.01%左右，它的測定要求按照藥典第二部化藥附錄VIID 氮測定法第二法(半微量法)。由于樣品中存在大量水分，消解過程需緩慢升溫;且樣品消解加入硫酸僅2ml，也是一個消解的難題。
2 實驗部分
2.1儀器和試劑
Hanon K1100F全自動凱氏定氮儀
Hanon SH420F石墨爐消解儀
98%硫酸
硫酸鉀
30%硫酸銅
40%氫氧化鈉
2%硼酸
0.0104mol/L硫酸滴定液
2.2 實驗步驟
2.2.1取樣
精確稱取10ml樣品，石墨爐上150℃揮去大部分水分。消化管冷卻后，加入0.3硫酸鉀和30%硫酸銅5滴，2ml濃硫酸。并做空白實驗。
2.2.2 消解
消化管上方加蓋玻璃小漏斗，消解溫度設(shè)置如下：
200℃ 30min
300℃ 30min
400℃ 90min
2.2.3 蒸餾滴定計算
采用邊蒸餾邊滴定模式，凱氏定氮儀儀器參數(shù)設(shè)置為：硼酸(含指示劑)：10ml;堿：10ml;稀釋水：10ml;蒸餾：5min;滴定酸濃度：0.0104mol/L。
測試結(jié)果如下：
空白體積0.3062ml
相對標準偏差(RSD)=標準偏差(SD)/計算結(jié)果的算術(shù)平均值(X)*100%
3 結(jié)果與討論
樣品消解：先揮去大部分水分，防止上沖;為避免硫酸過量損失，防止消化管燒干，可用玻璃漏斗代替排廢罩。消解過程中注意觀察，消解澄清后30min停止加熱。從樣品測定結(jié)果來看平行性良好，符合藥典要求。
參考文獻
2015版中國藥典第二部化藥附錄VIID 氮測定法第二法(半微量法)