凱氏定氮法測(cè)定肉中的揮發(fā)性鹽基氮（K1160）
1 前言
揮發(fā)性鹽基氮（TVB-N）指動(dòng)物性食品由于酶和細(xì)菌的作用，在腐敗過程中，使蛋白質(zhì)分解而產(chǎn)生氨以及胺類等堿性含氮物質(zhì)。此類物質(zhì)具有揮發(fā)性，其含量越高，表明氨基酸被破壞的越多，因此營(yíng)養(yǎng)價(jià)值大受影響。根據(jù)《GBT 32141-2015 飼料中揮發(fā)性鹽基氮的測(cè)定》為大家介紹一下狗糧中揮發(fā)性鹽基氮在全自動(dòng)定氮儀上的測(cè)定方法。
2 實(shí)驗(yàn)部分
2.1原理
根據(jù)《GBT 32141-2015 飼料中揮發(fā)性鹽基氮的測(cè)定》進(jìn)行測(cè)定。揮發(fā)性鹽基氮具有揮發(fā)性，加堿蒸餾后，用硼酸吸收后，再以鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液進(jìn)行滴定。
2.2 儀器與試劑、器具
2.2.1 K1160F全自動(dòng)凱氏定氮儀(濟(jì)南海能儀器股份有限公司)。
2.2.2 鹽酸 分析純，c(HCL)=0.1mol/L，標(biāo)準(zhǔn)滴定液。
2.2.3 硼酸 分析純，質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%。
2.2.4 氫氧化鈉 分析純，質(zhì)量分?jǐn)?shù)4%。
2.2.5 溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑 將溴甲酚綠乙醇溶液(1g/L)與甲基紅
乙醇溶液(1g/L)按5：1體積比臨時(shí)混合搖勻備用。
2.2.6 高氯酸溶液（0.6mol/L）量取高氯酸50.0ml,定容至1000ml容量瓶中。
2.2.7硅油消泡劑
2.2.8分析天平（萬(wàn)分之一）
2.3 實(shí)驗(yàn)部分
2.3.1樣品制備：萬(wàn)分之一天平精確稱取5g左右樣品（精確到0.1mg）至錐形瓶中,加入高氯酸溶液40ml,振搖30min,將試樣及試樣浸提液完全轉(zhuǎn)移至50ml容量瓶中，并用高氯酸溶液定容至50ml。搖勻后，取30ml試樣浸提液于50ml離心管中，轉(zhuǎn)速3500r/min，離心5min。取上清液2℃-6℃條件下貯存，可以存放24h。
2.3.3 取10ml上清液于消化管中，加入幾滴硅油消泡劑，將消化管放置于定氮儀上。定氮儀設(shè)置程序如下：
稀釋水： 00ml
硼酸： 30ml
堿： 10ml
蒸餾時(shí)間： 5min
2.3.4 儀器自動(dòng)滴定。
3 結(jié)果與討論
氮含量 
式中：X—試樣中揮發(fā)性鹽基氮的含量,單位為毫克每百克(mg/100g;
V1 —測(cè)定用樣液消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積,單位為毫升(mL);
V0—空白消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積,單位為毫(mL);
V’—試樣提取液分取體積的體積,單位為毫(mL);
V’—試樣提取液定容體積的體積,單位為毫(mL);
C—鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的濃度,單位為摩爾每升(mol/L);
14.01—與1.0mL鹽酸[c(HCl)=1.000mol/L]標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液相當(dāng)?shù)牡馁|(zhì)
量,單位為克每摩爾(g/mol );
m—試樣質(zhì)量,單位為克(g)或試樣體積,單位為(mL):
100 ———計(jì)算結(jié)果換算為毫克每百克(mg/100g)的換算系數(shù)。