旋光法測定飼用秸稈的淀粉含量
1 前言
秸稈是草食家畜主要的飼料來源。對秸稈營養(yǎng)價(jià)值的評定是秸稈資源合理利用的基礎(chǔ)，淀粉是反映飼料營養(yǎng)價(jià)值的一個(gè)重要指標(biāo)。但秸稈的淀粉含量一般都不高，準(zhǔn)確測定不易，因而對秸稈中淀粉含量測定方法的探索具有實(shí)踐意義。本文用旋光儀按照飼料中淀粉含量測定的方法進(jìn)行檢測，操作簡單，重復(fù)性好。
2 儀器與試劑
2.1 儀器
P850全自動(dòng)旋光儀，分析天平
2.2 試劑
乙醇（40%），鹽酸，亞鐵氰化鉀，乙酸鋅（以上試劑均為分析純）
3 實(shí)驗(yàn)方法
3.1耗酸量測定
稱取約2.5g制備好的試樣（精確到1mg），定量轉(zhuǎn)移到50mL錐形瓶中，加入25mL水，振搖至形成均勻的懸濁液。將pH計(jì)的電極置于懸濁液中，用滴定管在鹽酸溶液至pH為3.0±0.1，劇烈振搖懸濁液，并靜置2min，檢查試樣所消耗鹽酸是否平衡，如果在此過程中，pH升高超過3.1，再用滴定管滴加鹽酸溶液（0.31mol/L），必要時(shí)可多次滴加鹽酸，直到不需要更多的鹽酸為止。根據(jù)所用鹽酸溶液體積計(jì)算出試樣的耗酸量。
3.1 總旋光度的測定
稱取約2.5g制備好的試樣，精確到1mg，定量轉(zhuǎn)移到干燥的100mL容量瓶中，加25mL鹽酸溶液(0.31mol/L)，振搖至形成均勻的懸濁液，再加入25 mL鹽酸溶液(0.31mol/L)。加入適當(dāng)濃度的鹽酸，補(bǔ)足試樣的耗酸量，且使容量瓶中內(nèi)容物的體積變化不超過1mL。將容量瓶浸入沸水浴中，前3min用力振搖容量瓶，以避免結(jié)塊并使懸濁液受熱均勻，振搖時(shí)錐形瓶不能離開水浴。如果同時(shí)測定多個(gè)試樣，容量瓶不要同時(shí)放入水浴，每個(gè)樣品要間隔一定時(shí)間，以保持水浴沸騰。15min±5s后，取出容量瓶，立即加入溫度不超過10℃的水30mL，旋動(dòng)容量瓶，在流水中冷卻至20℃左右。加入5mL亞鐵氰化鉀溶液，振搖1min，加入5mL乙酸鋅溶液，振搖1min，用水稀釋至刻度，混勻，過濾，棄去初始的數(shù)毫升濾液，用旋光儀測定濾液的旋光度（α1）。
3.2 乙醇溶解物的旋光度測定
稱取5g制備好的試樣，精確至1mg，定量轉(zhuǎn)移到干燥的100mL容量瓶中，加40mL乙醇溶液(40%)，振搖至形成均勻的懸濁液，然后再加40mL乙醇溶液（40%），加適當(dāng)濃度的鹽酸以補(bǔ)充試樣的耗酸量，使瓶中內(nèi)容物的體積變化不超過1ml。用力振搖，在室溫下靜置1h，在此期間至少每隔10min振搖一次。用乙醇溶液（40%）稀釋至刻度，混勻，過濾，棄去最初數(shù)毫升溶液。吸取50mL濾液于100mL容量瓶，加人2.0mL鹽酸溶液（7.73mol/L）用力振搖，并將其浸人沸水浴中。15min±5s后，從水浴中取出容量瓶，立即加溫度不超過10℃的水30mL，轉(zhuǎn)動(dòng)容量瓶并在冷水中冷至20℃左右。加5mL亞鐵氰化鉀溶液，振搖1min，加5ml乙酸鋅溶液，振搖1min，用水稀釋至刻度，搖勻，過濾，棄去最初數(shù)毫升濾，用旋光度測定濾液的旋光度(α2)。
3.3 計(jì)算公式
試樣的淀粉含量由下式計(jì)算：
--總旋光度的數(shù)值，以度表示；
--測定乙醇溶解物的旋光度值，以度表示；
--測定總旋光度時(shí)試料的質(zhì)量，單位為克（g)；
--測定乙醇溶解物旋光度時(shí)試料的質(zhì)量，單位為克（g)；
--在波長為589.3nm（鈉D線）處測定純淀粉比旋度的數(shù)值。其他淀粉及動(dòng)物飼料中混合淀粉按184.0°計(jì)。
4 結(jié)果與討論
從上表的數(shù)據(jù)中可以看出，用旋光儀測定的淀粉含量重復(fù)性好，儀器操作簡單，提高了工作效率。
參考文獻(xiàn)
[1]GB/T 20194-2006 飼料中淀粉含量的測定 旋光法.[S]
注意事項(xiàng)
本方法不適用于含有在分析過程中具有光學(xué)活性，且不溶于40%乙醇的淀粉以外的其他物質(zhì)的產(chǎn)品，如馬鈴薯漿，甜菜的絲、葉、根、冠，酵母，大豆產(chǎn)品，羽扇豆、富含葡萄糖的產(chǎn)品，如菊首根和菊芋等，此時(shí)可用酶法測定淀粉含量，否者測定淀粉含量偏高或偏低。直鏈淀粉超過40%時(shí)，不宜用本法測定淀粉含量，如高直鏈玉米淀粉 HylonVII。